AOAC使用稀释法是一种测试消毒剂功效的方法，最初发展于1955年。经过多次修订，它已成为评估用于坚硬表面的液体和可稀释液体消毒剂的标准。特别是，这种方法被美国环保局指定为消毒剂索赔证明的必要方法。
简单地说，使用稀释法是将不锈钢载体浸泡在细菌中，用消毒剂处理，最后将载体放入生长肉汤中，以确定是否还有存活的细菌。这使得该方法成为一种定性的方法，这意味着结果是由细菌是否生长决定的，而不是通过列举细菌。
业内人士和EPA经过数年的努力，对该方法进行了最新修订，其中之一是降低了对金黄色葡萄球菌而且铜绿假单胞菌，使得测试的通过/失败判断更加可靠。这也使测试更容易通过，这让消毒剂的开发人员非常高兴。
随着性能标准的改变，EPA还增加了一项要求，对某些微生物，不同批次的测试产品在不同的日子进行测试。
注:以下信息仅供教育用途。目前，详细的AOAC方法可以从AOAC中获得。
试验方法及重要参数摘要
- 对单个细菌种类进行48小时的培养后，将其晒干在一些称为青霉柱(俗称“载体”)的小型圆柱形不锈钢测试表面上。
- 如果产品是作为“一步”清洁/消毒剂销售，则在试验开始前向培养物中添加有机土壤。
- 将载体(10、30或60)浸泡在细菌培养中。
- 对最初产品注册的测试需要在每批测试产品中使用每种微生物60个载体进行测试。在拼箱或以下生产的三批产品，必须对每个微生物进行检测。
- 对“补充生物”的测试需要在每批测试产品中使用10个载体进行每个微生物的测试。在拼箱或以下生产的两批产品，必须对每个微生物进行检测。
- 用于研发目的的非glp筛选也可以在10个、30个或60个载体上执行。
- 载体是干燥的。
- 在试验开始前列举三种载体，以确定试验前的载体微生物浓度。
- 每个干燥的、受污染的测试载体被单独转移到装满10毫升消毒剂的试管中，在那里孵育指定的接触时间。
- 测试中使用的接触时间将是EPA在产品标签上允许的接触时间。
- 接触时间过去后，处理过的测试载体被单独转移到含有液体中和剂/生长介质的试管中。
- 在检测结束后立即列举三种载体，以确定检测后的载体微生物浓度。
- 处理过的测试表面在中和生长培养基中培养48小时。
- 孵育后，记录显示目标微生物生长的试管数量。
- 为沙门氏菌血清为了“通过”60个载体测试，每批次测试中至少59个表面必须显示完全消毒。
- 为铜绿假单胞菌为了“通过”60个载体测试，每批次测试中至少有54个表面必须显示完全消毒。
- 为金黄色葡萄球菌为了“通过”60个载体测试，每批次测试中至少有57个表面必须显示完全消毒。
- 为了“通过”10个载体的检测，必须对所有检测表面进行彻底消毒。
AOAC使用稀释试验方法的优点
- EPA批准AOAC使用稀释试验，用于在美国销售的可稀释消毒剂注册时提交数据。现在性能标准已经调整，使用dilu对于大多数产品来说，消毒法可能比另一种用于将液体登记为消毒剂的方法更容易通过AOAC杀菌喷雾产品消毒剂．
- AOAC使用稀释测试是消毒剂的“高级”测试，这意味着抗菌溶液必须在相对短的时间内具有明显的生物杀灭活性才能通过测试。
测试方法的弱点
- 仅根据统计数据，AOAC使用稀释试验方法具有一些固有的可变性。例如,对于金黄色葡萄球菌在美国，如果一个产品的平均合格率为3/60，那么它在测试中的失败率是相当高的。
- AOAC使用稀释试验由于官方方法的模糊性而受到额外的变化。例如，官方测试方法没有解决重要的参数，如载体干燥过程中的湿度水平。
- AOAC使用稀释试验与“现实生活”中消毒剂的使用相差甚远。与“现实生活”中的产品使用最明显的区别是，在整个接触时间(长达10分钟)内，被污染的表面都浸泡在过量的消毒剂中。
- 为了避免假阳性结果，进行使用稀释试验的科学家必须具有在相当长的时间压力下处理金属钩的经验和技能，并且必须能够在试管之间转移受污染的青霉素柱，而不接触试管的边缘或以其他方式污染测试系统。
2022足球世界杯32强微化学实验室投入了大量的时间和精力来完善我们执行AOAC使用稀释试验方法的方法。我们采取了许多措施来减少测试间的可变性，已经成功地向EPA提交了项目注册数据，并急切地回答客户可能对该测试提出的问题。