诺瓦克病毒

诺瓦克病毒

无包膜病毒

病毒 人类诺瓦克病毒

猫杯状病毒(美国epa人诺如病毒代物)

结构 无包膜 无包膜
家庭 Caliciviridae Caliciviridae
主机(年代) 人类
疾病引起的 急性胃肠炎 呼吸系统疾病肺炎发烧
症状 恶心、呕吐、腹泻、腹部绞痛 流鼻涕/眼睛、打喷嚏、发烧、口腔溃疡
潜在并发症 严重脱水 肺炎、残废
传输方式

环境:
水性,食源性

人与人:
粪便/ vomitus-oral

污染物:污染的表面

Cat-to-cat联系:
眼睛/鼻子/嘴巴液体

污染物传输:
食物/水的碗

社区爆发地点* 游轮
餐厅/满足事件
娱乐网站
医院
养老院
学校/日托中心
动物收容所
宠物店
兽医诊所

人类诺如病毒的重要性

人类诺如病毒是一种高度传染性的病毒病原体,每年在美国和世界范围内引起急性肠胃炎流行。该疾病的特点是迅速出现呕吐和/或腹泻、恶心和短暂的腹痛,一般持续24至72小时。然而,诺如病毒可能会在症状出现前脱落,并在病情消退数周后在粪便中脱落(12)。

诺如病毒爆发一般发生在有利于人传人的地方,包括学校、医院病房和邮轮(1,6,18,20)。流行病还与婚礼、漂流旅行和体育赛事等活动有关(3,11,15),此外还与生产品、贝类和熟食食品的消费有关(8,15,19)。

使用替代病毒进行人体诺如病毒研究及效能测试

尽管诺如病毒在人类中普遍存在,但事实证明,它们很难在细胞培养系统中成功繁殖。因此,MS-2噬菌体、猫杯状病毒以及最近的小鼠诺如病毒被用作人类诺如病毒的模型来进行病毒杀灭效果的研究。

MS-2噬细胞是一种感染“男性”的病毒大肠杆菌表面有F菌毛的细胞。MS-2和人诺如病毒是结构相似的非包膜病毒;每个核衣壳由二十面体组成,三角形数相同(T=3)。MS-2脂质体也特别耐寒和耐环境。它们的培养和纯化相对简单,在实验室设置的适当条件下容易获得高的病毒滴度。利用MS-2脂肪蛋白作为人类诺如病毒或其他无包膜病毒的替代品的杀病毒效果评估也可获得快速测试结果(在试验开始后18至48小时以上,相对于猫杯状病毒替代品5至7天)。病毒斑块可见于大肠杆菌宿主草坪,分析结果通常以每单位体积或每载体形成斑块的单位(PFU)来表示。使用MS-2作为无包膜哺乳动物病毒替代物进行生物杀灭效果评估的文献已发表,包括悬浮液时间杀灭试验和表面消毒剂试验(10,14)。

猫杯状病毒(FCV)和人类诺如病毒属于同一个病毒家族,Caliciviridae,虽然是不同的属(分别是维塞病毒和诺如病毒)。因此,FCV和人类诺如病毒在大小和结构上具有高度的可比性。由于系统发育相关性较高,再加上已经建立的直接的细胞培养检测系统,2005年,美国环保署推荐了猫杯状病毒作为人类诺如病毒的替代品,用于病毒杀灭效果的测试。猫杯状病毒的宿主细胞系为Crandell-Rees猫肾(CRFK),该细胞系易于通过标准的传代培养技术建立和维持。虽然上述5 - 7天的分析周期比MS-2更长,但来自美国epa要求的TCID的数据50(50%终点时的组织培养感染剂量)试验在必要的研究对照(例如:病毒控制和细胞毒性)的适当表现下是一致的。然后使用一种已建立的统计方法(如Reed-Muench或Spearman-Karber)评估病毒和毒性滴度。猫杯状病毒已被用于许多研究,评估每一类消毒剂,包括醇、卤素、季铵盐化合物和戊二醛(9,13,16)。

与猫杯状病毒类似,鼠诺如病毒(MNV)与人诺如病毒属于同一病毒家族。然而,与猫杯状病毒不同,MNV属于该属诺瓦克病毒从而与人类诺如病毒有更大的系统发育相关性。此外,MNV和人类诺如病毒分别被证明是小鼠和人类的肠道病原体,而猫杯状病毒通过鼻腔、口腔和结膜途径感染(17)。小鼠诺如病毒(MNV-1)的细胞培养试验采用小鼠巨噬细胞宿主细胞系,通过空斑试验或TCID进行50试验(21)。在病毒杀灭效果评价中,MNV也越来越多地被用作人类诺如病毒的替代品。

直接评估抗病毒对人类诺如病毒的疗效将是最理想的。然而,一种能够检测传染性诺如病毒的简单的细胞培养系统仍然难以实现。虽然人类诺瓦克病毒的每一种替代品都有其优缺点,但它们仍是有效的研究模型,用于有效性测试。美国环保局还坚持使用猫杯状病毒作为人类诺如病毒消毒剂标签声明的可接受模型。

消毒的重要性:人类诺瓦克病毒替代品在表面上的生存和通过污染物传播的可能性

人类诺如病毒的传播途径一般描述为粪-口传播。在短暂的肠胃炎发作期间,感染者可能会流出11根以上的木头10病毒每克粪便(5),通常通过拉肚子或直接腹泻。通常与人类诺如病毒感染有关的急性抛射性呕吐也会排出大量病毒(1)。在这些呕吐过程中,诺如病毒会被感染者或看护者接触到手上;然后,这些病毒被转移到各种不同组成和质地的污染物上(2,4,5)。在呕吐事件中雾化的病毒颗粒也会落在事件附近的污染物表面上(1)。人体诺如病毒的最低感染剂量很低[10至100,(1)],再加上证明病毒从污染的表面转移到以前未污染的手,表明一种潜在的间接传播途径,值得公共卫生和研究界继续考虑。

随着时间的推移,由于温度和湿度等一系列环境参数的影响,诺如病毒通过呕吐或腹泻被人类宿主排出后,不可避免地失去传染性和活力。猫杯状病毒(人类诺如病毒替代品)在不同温度、湿度和表面(污染物)类型下的病毒失活率已被广泛研究。与实验室研究中常见的趋势一样,猫杯状病毒(无包膜)在表面存活的时间比包膜病毒更长(5)。与真正的肠道病原体,如甲型肝炎病毒和小鼠诺如病毒相比;然而,猫杯状病毒(一种呼吸道病毒)确实表现出更高的失活率,尤其是在极端pH值(7)。就环境稳定性而言,猫杯状病毒和小鼠诺如病毒在4°C条件下干燥到不锈钢表面和悬浮(湿条件)时表现出同样低的失活模式;在室温下;然而,在潮湿和干燥的条件下,小鼠诺如病毒相对于猫杯状病毒保持了更强的生存能力(7)。

使用上述人类诺如病毒替代品进行了大量的消毒研究,其中大部分是猫杯状病毒。在研制出可用于人类诺如病毒的细胞培养系统并能够进行直接的病毒杀灭效果评估之前,替代病毒将继续使用。

选择相关的文献
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